Настройка системы оптического пути изображения светового микроскопа и схемы микроскопического исследования
Настройка системы оптического пути визуализации и схемы микроскопического исследования
Настройка отображающей оптической системы микроскопа осуществляется в соответствии с потребностями различных методов микроскопии. Вкратце, так называемая микроскопия — это метод освещения, используемый при наблюдении образца через микроскоп, а также техника и метод получения лучшего контраста изображения, формируемого образцом. Ниже кратко описывается микроскопия, развитая в нескольких методах, и соответствующий метод настройки оптической системы визуализации микроскопа.
1. Яркое поле передачи:
Это наиболее традиционный и распространенный метод применения со времен изобретения микроскопа. Основные компоненты: а. Объектив: для наблюдения в светлом поле можно использовать любой объектив; б. Зрительная труба: можно использовать все виды зрительных труб, желательно с апертурной диафрагмой. Метод настройки: После настройки системы освещения Кулера вышеуказанного микроскопа можно применить метод светлого поля. Область применения: все окрашенные срезы тканей, мазки крови и т. д. Меры предосторожности: а. При использовании метода наблюдения по светлому полю необходимо отрегулировать систему освещения Кюлера; б. Диафрагма поля зрения не должна открываться произвольно, а передняя линза конденсорного зеркала должна быть расположена фактически наружу и внутрь оптического пути соответственно при использовании объективов с кратностью 10×, менее 10× и более 10. ×; в. Апертурную диафрагму конденсорного зеркала нельзя использовать для регулировки яркости поля зрения, а высоту конденсорного зеркала нельзя регулировать без разбора, иначе разрешение микроскопа будет снижено, а разрешение окрашенной ткани будет поврежден. разрешение микроскопа и повреждения подогнаны под систему освещения Kuhler; д. для микроснимков при каждом изменении применения увеличения объектива приходится регулировать апертурную диафрагму конденсорной линзы так, чтобы ее размер точно равнялся используемой в объективе числовой апертуре 2/3.
2. Метод фазового контраста в проходящем свете:
Это современное микроскопическое исследование метода усиления контраста. Основные компоненты: фазово-контрастный объектив, яркое поле зрения и фазово-контрастная универсальная зрительная труба, фокусирующая телескоп, зеленые светофильтры.
Методы регулировки:
а. Основываясь на настройке системы освещения Кулера, четко сфокусируйте образец, используя метод светлого поля.
б. Поверните зрительную трубу в положение Ph1, чтобы выровнять положение циферблатной шкалы, выберите объектив с фазовым контрастом 10 × и замените прозрачный образец для наблюдения.
в. Отсоедините один из окуляров, замените его центрированным телескопом и сфокусируйтесь на двух кольцах фазового контраста в поле зрения (черном кольце фазового контраста объектива и светопроницаемом кольце фазового контраста конденсорной линзы).
д. Два кольца фазового контраста в поле зрения могут не обязательно совпадать, отрегулируйте два регулировочных устройства на зрительной трубе (регулировку левого и правого положения рычага регулировки кольца фазового контраста и регулировку переднего и заднего положения фрикционной ручки) , чтобы светопропускающее кольцо спереди и сзади справа и слева совпадало с черным кольцом.
е. После настройки вернитесь к окуляру для наблюдения и вставьте зеленый фильтр в оптический путь, чтобы наблюдать фазово-контрастное изображение образца.
ф. При наличии для наблюдения объективов 20× и 40× зрительную линзу следует установить в положение Ph2, а при использовании объективов 100× зрительную линзу следует установить в положение Ph3.
Область применения: Подходит для наблюдения за прозрачными, неокрашенными или неокрашенными образцами, такими как все виды клеток, живые ткани, неокрашенные или неокрашенные срезы тканей, водные организмы и так далее.
3. Дифференциально-интерференционный метод фазового контраста:
Чтобы преодолеть фазовый контраст, метод наблюдения деталей образца вокруг изображения, сопровождаемого ореолом, позволит замаскировать детали, которые должны были быть видны, а также образцы или срезы тканей требуют достаточно малой толщины, что в принципе можно быть толще 10 мкм и другие ограничения, использование принципа двухлучевой интерференции для разработки метода фазового контраста субдифференциальной интерференции.
Методы регулировки:
а. Метод ДИК необходимо корректировать исходя из того, что система Кулемина уже настроена.
б. Используя объектив 10×, определите положение фокусировки объектива, при котором образец может быть четко виден в ярком поле зрения.
в. Поместите поляризатор на путь освещения, обратите внимание, что он должен быть ориентирован в направлении восток-запад.
д. Поверните диск конденсора в положение, соответствующее использованию объектива 10 ×, т. е. DIC 0.3-0.4.
е. Вставьте ползунок DIC для объектива 10× в заднюю часть объектива или на конвертор объектива.
ф. Вставьте анализатор в оптический путь визуализации и обратите внимание, что его ориентация должна быть юг-север.
г. Замените прозрачный образец, который необходимо наблюдать, включите источник света, чтобы четко сфокусировать образец.
час Отрегулируйте вставку DIC так, чтобы контрастное изображение с дифференциальной интерференцией достигало наилучшего эффекта, то есть наиболее очевидного эффекта рельефа.
я. При этом отрегулируйте апертурную диафрагму конденсорного зеркала так, чтобы эффект контраста также был оптимальным.
Дж. Затем настройте детали выборки, чтобы увидеть структуру выборки на разных уровнях.
к. Если вставить дополнительный цвет (красную пластину замедления первого порядка) и одновременно отрегулировать вставку DIC, в поле зрения можно увидеть постоянно меняющиеся яркие цвета: красный, оранжевый, желтый, зеленый, синий, фиолетовый, розовый, розово-фиолетовый и золотисто-желтый. Область применения: прозрачные или неокрашенные срезы тканей толщиной до 100 мкм, живые ткани и живые клетки в культуре, мелкие живые организмы и т.д.
