Преимущества и недостатки многофотонной лазерной сканирующей микроскопии
Преимущества следующие:
1. Взволнованный красным или инфракрасным светом, рассеяние света невелико (рассеяние мелких частиц обратно пропорционально четвертой мощности длины волны).
2. Нет необходимости в отсеках, способных собирать более разбросанные фотоны из поперечного сечения изображений.
3. Охоты не могут различать рассеянные фотоны, испускаемые из дефокусированных или фокусных областей, и многофотоны имеют лучшее отношение сигнал / шум при глубокой визуализации.
4. Ультрафиолетовый или видимый свет, используемый для одно фотонного возбуждения, легко поглощается и ослабляется образцом, прежде чем луч достигает боковой плоскости, что затрудняет возбуждение глубоких слоев.
5. С точки зрения наблюдения биологической микроскопии, первым соображением не является повреждение активного состояния самого организма и поддерживать кровообращение воды, концентрации ионов, кислорода и питательных веществ. В области светового наблюдения как тепловая, так и энергия фотонов должна оставаться в дозе облучения и энергии света, которые не повреждают ячейки.
6. Многототонная микроскопия также имеет много преимуществ. С точки зрения трехмерного разрешения, инвазии глубины, эффективности рассеяния, фонового света, отношения сигнал / шум, контроля и т. Д., Лазерные микроскопы имеют непревзойденные или превосходные характеристики, которыми не обладали предыдущие лазерные микроскопы.
Многототонная конфокальная лазерная сканирующая микроскопия была расширена на различные области исследований и применения, она может выполнять трехмерное неразрушающее наблюдение на образцах в их естественном состоянии и улучшать разрешение и отношение сигнал / шум в системе путем использования изменений в материалах после многофотонного возбуждения, высокие прикладные данные, которые также имеют высокую высокую высоту, а также в трехэтапных, которые также имеют высокую высокую высоту, что также может также может быть связано с высокой высокой высокой высокой высокой, и то, что также имеет высокую высоту применения. Можно полагать, что при дальнейшей разработке механических, материальных и лазерных технологий, связанных с многофотонной конфокальной микроскопией, многофотонной конфокальной лазерной сканирующей микроскопии будет иметь большую разработку и более широкие приложения
Недостатки следующие:
1. Только для флуоресцентной визуализации.
2. Если образец включает хромофоры, которые могут поглощать свет возбуждения, такой как пигменты, образец может подвергаться тепловым повреждениям.
3. Разрешение слегка уменьшено, хотя его можно улучшить, одновременно используя конфокальные небольшие отверстия, будет потеряна потерю сигнала.
4. Из -за ограничений дорогих сверхбыстрых лазеров стоимость многофотонных сканирующих микроскопов относительно высока.
