Технические параметры конфокального микроскопа
1 разрешение
Системное распределение функции рассеяния точки конфокального микроскопа равно свертке линзы объектива и распределению энергии изображения точки. В случае того же объектива его поперечное разрешение (плоскость xy) в 1,4 раза выше, чем у традиционных оптических микроскопов, достигая 0,4λ/NA. Например, разрешение Leica TcS-NT составляет 0,18 мкм. Из принципа работы конфокального микроскопа мы знаем, что установка точечного отверстия на детекторе не только эффективно подавляет интерференцию изображения точки не в фокусе с изображением плоскости обнаружения, но также подавляет интерференцию необнаружения. точку на плоскости квазифокуса в точку обнаружения, что значительно улучшает разрешение изображения. Кроме того, для достижения высокого разрешения системы конфокальных микроскопов должны быть оснащены виброустойчивым столиком.
2 Чувствительность
Традиционные оптические микроскопы часто оснащены ПЗС-камерами для сбора изображений, но из-за относительно низкой чувствительности ПЗС свет с низкой освещенностью, такой как флуоресценция, не может быть обнаружен, поэтому трубки фотоумножителей обычно используются в качестве элементов обнаружения в системах конфокальных микроскопов. Гораздо больше, чем ПЗС, он также может показывать высокую чувствительность к слабым флуоресцентным сигналам.
3 Горизонтальное разрешение
Системы конфокальной микроскопии показывают больше деталей в увеличенных изображениях, чем обычная световая микроскопия. Упомянутое здесь увеличение не относится к физическому увеличению, а относится к морфологическим деталям изображения, отображаемого конфокальным микроскопом при том же условии увеличения объектива, которое трудно увидеть под традиционным оптическим микроскопом, поэтому изображение яснее и тоньше. Горизонтальное разрешение выше.
4 Контраст
Поскольку свет, освещающий объект, представляет собой лишь очень маленькое сфокусированное световое пятно при сканировании, а яркость и отношение сигнал/шум высокие, сигнальный свет сильнее, чем в других точках объекта. На плоскости изображения точечный детектор может принимать только свет, проходящий через точечное отверстие, в то время как рассеянный свет от других частей объекта отфильтровывается, поскольку он не может быть сфокусирован на конфокальном отверстии. Это приводит к получению более контрастных изображений образцов, полученных с помощью конфокальных сканирующих микроскопов, чем с помощью обычных микроскопов.
