Различия между флуоресцентной микроскопией и конфокальной микроскопией
флуоресцентный микроскоп
1. Флуоресцентный микроскоп использует ультрафиолетовый свет в качестве источника света, чтобы облучать проверенный объект, заставляя его излучать флуоресценцию, а затем наблюдать за формой и положением объекта под микроскопом. Флуоресцентная микроскопия используется для изучения поглощения, транспорта, распределения и локализации веществ в клетках. Некоторые вещества в клетках, такие как хлорофилл, могут флуоресцировать при воздействии ультрафиолетового излучения; Есть также некоторые вещества, которые не могут самостоятельно излучать флуоресценцию, но также могут излучать флуоресценцию, если окрашены флуоресцентными красителями или флуоресцентными антителами, и облученным ультрафиолетовым светом. Флуоресцентная микроскопия является одним из инструментов для качественного и количественного исследования таких веществ.
2. Принцип флуоресцентного микроскопа:
(А) Источник света: источник света испускает свет различных длин волн (от ультрафиолетового до инфракрасного).
(B) Источник света фильтра возбуждения: передача света определенной длины волны, которая может вызвать флуоресценцию в образце, при этом блокируя свет, который бесполезен для захватывающей флуоресценции.
(C) Флуоресцентные образцы: обычно окрашены флуоресцентными пигментами.
(D) Блокировка фильтра: он избирательно передает флуоресценцию, блокируя свет возбуждения, который не поглощается образцом, и некоторые длина волн во флуоресценции также селективно передаются. Микроскоп, который использует ультрафиолетовый свет в качестве источника света, чтобы заставить освещенный объект излучать флуоресценцию. Электронный микроскоп был впервые собран Knorr и Haruska в Берлине, Германия, в 1931 году. Этот микроскоп использует высокоскоростные электронные лучи вместо лучей. Из -за гораздо более короткой длины волны электронного потока по сравнению с световыми волнами увеличение электронного микроскопа может достигать 8 0 0000 раз с минимальным пределом разрешения 0,2 нанометров. Сканирующий электронный микроскоп, который впервые использовался в 1963 году, позволяет людям видеть крошечные структуры на поверхности объектов.
3. Применение приложения: используется для увеличения изображений небольших объектов. Обычно используется для наблюдений за биологией, медициной, микроскопическими частицами и т. Д.
Конфокальный микроскоп
1. Конфокальный микроскоп добавляет полуоттраamective Half -Lens к отраженному пути света, который отклоняет отраженный свет, который проходил через линзу в других направлениях. В своем фокусном точке есть перегородка с облицовками, расположенной в фокусе, а за перегородкой находится фотоумножильная трубка. Можно представить, что отраженный свет до и после того, как фокус света обнаружения не может быть сосредоточен на небольшом отверстии через эту конфокальную систему и будет заблокирован перегородкой. Таким образом, фотометр измеряет отраженную интенсивность света в фокусе.
2. Лазерный сканирующий конфокальный микроскоп использует лазерный луч для освещения шестерни и сформировать точечный источник света, чтобы сканировать каждую точку на фокальной плоскости образца. Точка освещения на образце изображается на обшивке обнаружения и получает точку по точке или линии с помощью фотоумножильной трубки (PMT) или устройства холодного соединения (CCCD) после обнаружения руку, быстро образуя изображение флуоресценции на экране монитора компьютера. Освещение облигации и шестерни для обнаружения сопряжены по сравнению с фокальной плоскостью объективной линзы. Точки на фокальной плоскости одновременно сосредоточены на обшивке освещения и руке излучения, а точки за пределами фокальной плоскости не будут отображены на выявлении. Полученным конфокальным изображением является оптическое поперечное сечение образца, преодоление недостатка размытых изображений в общих микроскопах.
