Прямой микробиологический микроскопический подсчет
Прямой подсчет под микроскопом с использованием гематокритной пластинки является широко используемым методом подсчета микроорганизмов. Преимущество этого метода в том, что он интуитивно понятен и быстр. Соответствующим образом разведенную бактериальную суспензию (или суспензию спор) помещают в счетную камеру между предметным и покровным стеклами гематокритной пластинки и подсчитывают под микроскопом. Поскольку объем счетной камеры постоянен (0,1 мм2), количество микроорганизмов, наблюдаемое под микроскопом, можно перевести в общее количество микроорганизмов в единице объема. Этот метод также известен как общий подсчет бактерий, поскольку он подсчитывает сумму живых и мертвых организмов.
Гематокритная пластинка, обычно представляет собой специальное предметное стекло с тремя платформами, состоящими из четырех прорезей. Средняя платформа разделена на две половины короткой горизонтальной канавкой, на каждой стороне платформы выгравирована квадратная сетка, каждая квадратная сетка разделена в общей сложности на девять больших квадратов, середина большого квадрата представляет собой счетную камеру. Подсчет микроорганизмов проводится в счетной камере. Планшет для подсчета крови показан на рисунке VIII-1.
Масштаб счетной камеры обычно бывает двух размеров: в одном большой квадрат разделен на 16 средних квадратов, каждый из которых разделен на 25 маленьких квадратов (рис. VIII-2), а в другом - большой квадрат разделен на 25 средних квадратов, каждый из которых разделен на 16 малых квадратов (рис. VIII-1, В). Однако количество маленьких квадратов в каждом большом квадрате одинаково для любого размера счётной доски, т. е. 16 × 25=400 маленьких квадратов, как на рисунке VIII-2.
Длина стороны каждого большого квадрата составляет 1 мм, поэтому площадь каждого большого квадрата равна 1 мм2, а после закрытия покровного стекла высота между предметным и покровным стеклом составляет 0,1 мм, поэтому объем счетная камера - 0,1 мм3.
При подсчете обычно подсчитывают общее количество бактерий в пяти средних квадратах, затем получают среднее значение каждого среднего квадрата, затем умножают его на 16 или 25, чтобы получить общее количество бактерий в одном большом квадрате, а затем преобразуют его в общее количество бактерий в 1 мл бактериального раствора.
