Принципы флуоресцентной микроскопии и особенности строения
Флуоресцентная микроскопия - это использование высокой эффективности люминесценции точки посредством фильтрации цветовой системы для излучения определенной длины волны света (например, ультрафиолетового 3650 в или фиолетово-синего 4200 в) в качестве возбуждающего света, возбуждения Флуоресцентный материал внутри образца излучает флуоресценцию различных цветов, а затем увеличивается с помощью объектива и окуляров для наблюдения. Таким образом, на сильном контрастном фоне, даже если флуоресценция очень слабая, ее легко идентифицировать, высокая чувствительность, в основном используется для изучения структуры и функции клеток, а также химического состава. Базовая конструкция флуоресцентного микроскопа состоит из обычного оптического микроскопа и некоторых аксессуаров (таких как источник флуоресцентного света, фильтры возбуждения, двухцветный сепаратор пучка, блокирующие фильтры и т. д.). Источник люминесцентного света — обычно используемая ртутная лампа сверхвысокого давления (50-200Вт), которая может излучать свет различной длины, но каждый флуоресцентный материал имеет самую сильную длину волны возбуждения флуоресценции, поэтому необходимо добавлять фильтры возбуждения (обычно ультрафиолетовый, фиолетовый, синий и зеленый фильтр возбуждения), так что при облучении образцов поглощается только определенная длина волны возбуждающего света, в то время как другой свет поглощается. Поэтому необходимо добавить фильтр возбуждения (обычно ультрафиолетовый, фиолетовый, синий и зеленый фильтры возбуждения), чтобы только определенная длина волны возбуждающего света проходила через образец, в то время как остальной свет поглощался. Когда каждое вещество облучается возбуждающим светом, оно в течение очень короткого времени излучает видимую флуоресценцию с большей длиной волны, чем у облученного света. Флуоресценция имеет специфичность, как правило, более слабую, чем возбуждающий свет, чтобы иметь возможность наблюдать специфическую флуоресценцию, для использования необходимо выбрать объектив, требующий добавления блокировки (или подавления).
Отличие флуоресцентного микроскопа от обычного микроскопа
1. Способ освещения обычно падающий, т. е. источник света проецируется на образец через объектив;
2. Источником света является ультрафиолетовый свет с более короткой длиной волны и более высокой разрешающей способностью, чем у обычных микроскопов;
3. Имеется два специальных фильтра: фильтр перед источником света используется для фильтрации видимого света, а фильтр между окуляром и объективом используется для фильтрации ультрафиолетового света для защиты человеческого глаза.
Флуоресцентный микроскоп также является разновидностью оптического микроскопа, основное отличие которого состоит в том, что длины волн возбуждения у них разные. Это определяет структуру флуоресцентного микроскопа и обычного оптического микроскопа, а также использование различных методов.
Флуоресцентный микроскоп является основным инструментом иммунофлуоресцентной цитохимии. Он состоит из источника света, системы фильтрующих пластин, оптической системы и других основных компонентов. Он использует свет определенной длины волны, чтобы стимулировать образец излучать флуоресценцию, которая увеличивается с помощью объектива и системы окуляров для наблюдения флуоресцентного изображения образца.
