Как выбрать между инвертированным микроскопом и флуоресцентным микроскопом?
В экспериментах с клеточными культурами и связанными с ними производными микроскоп является очень важным инструментом. В настоящее время на рынке представлены различные типы микроскопов. Выбрать микроскоп, отвечающий потребностям и пригодный для применения, непросто. Ниже приводится введение в принципы инвертированных микроскопов и флуоресцентных микроскопов, чтобы вы могли легко выбрать.
Состав инвертированного микроскопа такой же, как у обычного микроскопа, в основном состоящий из трех частей: механической части, осветительной части и оптической части. Устройство инвертированного микроскопа такое же, как и у обычного прямого микроскопа, за исключением того, что объектив и осветительная система перевернуты, первая находится под столиком, а вторая — над столиком. Такая конструкция может значительно увеличить эффективное расстояние между концентрирующей системой освещения и предметным столиком, что удобно для размещения более толстых объектов для наблюдения, таких как чашки для культивирования и флаконы для клеточных культур (конечно, также доступны предметные стекла и т. д.) , и в то же время расстояние между линзой объектива и материалом. Рабочее расстояние между ними не должно быть очень большим. Инвертированные микроскопы применяются для наблюдения за микроорганизмами, клетками, бактериями, культурами тканей, взвесями, осадками и т. д. в лечебно-профилактических учреждениях, высших учебных заведениях и научно-исследовательских институтах. Он может непрерывно наблюдать за процессом размножения и деления клеток, бактерий и т. д. в культуральной среде и может фотографировать любую форму процесса. Он широко используется в цитологии, паразитологии, онкологии, иммунологии, генной инженерии, промышленной микробиологии, ботанике и других областях.
Флуоресцентную микроскопию применяют для изучения поглощения и транспорта веществ в клетках, распределения и локализации химических веществ и т. д. Для исследуемого объекта возможны два способа генерации флуоресценции: аутофлуоресценция, которая испускает флуоресценцию непосредственно после облучения ультрафиолетом свет; Некоторые вещества в клетках, такие как хлорофилл, после облучения ультрафиолетовыми лучами вызывают автофлуоресценцию; хотя некоторые вещества сами по себе не могут флуоресцировать, они также могут излучать вторичную флуоресценцию после окрашивания флуоресцентными красителями или флуоресцентными антителами после облучения ультрафиолетовыми лучами. Флуоресцентный микроскоп использует точечный источник света с высокой светоотдачей для излучения света определенной длины волны (ультрафиолетового света 365 нм или пурпурно-синего света 420 нм) через систему фильтров в качестве возбуждающего света и после возбуждения флуоресцентных веществ в образце для испускания флуоресценции различных цветов, то наблюдение производится через увеличение объектива и окуляра. Таким образом, на сильном контрастном фоне, даже если флуоресценция очень слабая, его легко идентифицировать и он обладает высокой чувствительностью. Он в основном используется для исследования клеточной структуры и функции и химического состава.
Флуоресцентные микроскопы делятся на просвечивающие и эпиэжекторные, первые более примитивны, а вторые более совершенны. Базовая структура двух типов флуоресцентных микроскопов аналогична, главное отличие состоит в том, что возбуждающий свет пропускающего типа проходит через образец, и весь образец генерирует флуоресценцию, которая затем попадает в объектив. Чем выше увеличение, тем слабее флуоресценция; возбуждающий свет эпиэмиссионного типа проецируется на поверхность образца, поверхность образца вызывает флуоресценцию, и флуоресценция снова попадает в линзу объектива. Чем выше увеличение, тем сильнее флуоресценция, что подходит для наблюдения с большим увеличением. Основные компоненты флуоресцентного микроскопа включают в себя источник света с ртутной лампой, фильтрующую пластину возбуждения, дихроичное зеркало (эпизодного типа), прессованную фильтровальную пластину и конденсор темного поля (просветного типа) и т. д. Кроме того, из-за сильное тепловыделение ртутных ламп, большинство из них также оснащены теплопоглощающими фильтрами. Некоторые флуоресцентные микроскопы также имеют фазово-контрастные объективы и кольцевые диафрагмы, поэтому возможны фазово-контрастные наблюдения. Существуют также флуоресцентные микроскопы с инвертированной структурой, еще один инвертированный микроскоп и так далее.
Кроме того, упомянутые выше микроскопы можно собрать в цифровой микроскоп, установив ПЗС-матрицу, преобразующую физическое изображение, видимое в микроскоп, в изображение на компьютере посредством цифро-аналогового преобразования. Таким образом, мы можем изменить исследование микроскопического поля с традиционного обычного бинокулярного наблюдения на воспроизведение на дисплее, тем самым повысив эффективность работы.
