Как выбрать между инвертированным микроскопом и флуоресцентным микроскопом?
Микроскоп является важным инструментом в культуре клеток и связанных с ними экспериментах с производными. В настоящее время на рынке представлены различные типы микроскопов, и выбор микроскопа, который соответствует потребностям и подходит, является непростой задачей. Ниже мы познакомим каждого с принципами работы инвертированных микроскопов и флуоресцентных микроскопов на выбор.
Инвертированный микроскоп, как и обычный микроскоп, в основном состоит из трех частей: механической части, осветительной части и оптической части. Состав инвертированного микроскопа такой же, как и у обычного прямого микроскопа, за исключением того, что объектив и система освещения перевернуты: первый находится под предметным столиком, а второй - над предметным столиком. Эта конструкция значительно увеличивает эффективное расстояние между системой освещения и сценой, облегчая размещение более толстых инструментов наблюдения, таких как чашки для культивирования и бутылки с клеточными культурами (конечно, можно также использовать стеклянные предметные стекла), в то время как рабочее расстояние между Объектив и материал не обязательно должны быть очень большими. Инвертированный микроскоп используется медицинскими и медицинскими учреждениями, университетами и научно-исследовательскими институтами для наблюдения за микроорганизмами, клетками, бактериями, тканевыми культурами, суспензиями, осадками и т. д. Он может непрерывно наблюдать за процессом пролиферации и деления клеток и бактерий в культуральной среде, а также может отразить любую форму этого процесса. Широко используется в таких областях, как цитология, паразитология, онкология, иммунология, генная инженерия, промышленная микробиология и ботаника.
Флуоресцентная микроскопия используется для изучения всасывания, транспорта, распределения и локализации веществ внутри клеток. Для испытуемого объекта существует два способа генерации флуоресценции: спонтанная флуоресценция, испускаемая непосредственно ультрафиолетовым излучением; Вторичная флуоресценция возникает, когда наблюдаемый объект обрабатывается флуоресцентными красителями и подвергается воздействию ультрафиолетового света перед испусканием флуоресценции. Некоторые вещества в клетках, например хлорофилл, после воздействия ультрафиолетового излучения вызывают спонтанную флуоресценцию; Некоторые вещества сами по себе могут не излучать флуоресценцию, но при окраске флуоресцентными красителями или флуоресцентными антителами они также могут излучать вторичную флуоресценцию под действием ультрафиолетового излучения. Флуоресцентный микроскоп использует точечный источник света с высокой светоотдачей для излучения света определенной длины волны (УФ 365 нм или синего УФ 420 нм) через систему цветовой фильтрации в качестве возбуждающего света, который возбуждает флуоресцентные вещества в образце, излучая различные цвета флуоресценции. После этого его наблюдают посредством увеличения объектива и окуляра. Таким образом, даже при слабой флуоресценции он легко распознается и обладает высокой чувствительностью на сильном контрастном фоне. Он в основном используется для изучения структуры, функций и химического состава клеток.
Флуоресцентную микроскопию можно разделить на два типа: трансмиссионную и падающую. Первый более примитивен, а второй более продвинут. Основная конструкция флуоресцентных микроскопов двух типов аналогична, с той основной разницей, что проходящий возбуждающий свет проходит через образец, вызывая флуоресценцию в целом. Затем флуоресценция попадает в объектив, и чем выше увеличение, тем слабее флуоресценция; Падающий возбуждающий свет проецируется на поверхность образца, создавая флуоресценцию, которая попадает в объектив. Чем выше увеличение, тем сильнее флуоресценция, что делает его пригодным для наблюдения при большом увеличении. Основные компоненты флуоресцентного микроскопа включают источник света с ртутной лампой, фильтрующую пластину возбуждения, спектрофотометр (капельного типа), пластину подавляющего фильтра и темнопольный конденсатор (пропускного типа). Кроме того, из-за сильного нагрева ртутных ламп большинство из них снабжено еще и теплопоглощающими фильтрами. Некоторые флуоресцентные микроскопы также имеют фазово-контрастный объектив и круглую апертуру, позволяющую вести фазово-контрастное наблюдение. Некоторые флуоресцентные микроскопы имеют инвертированную структуру, которая также является инвертированным микроскопом, и так далее.
Кроме того, вышеупомянутые микроскопы можно собрать в цифровые, установив ПЗС-матрицу, которая преобразует физические изображения, видимые микроскопом, в цифровые аналоговые изображения и отображает их на компьютере. В результате мы можем перевести наши исследования в микрополе с традиционного бинокулярного наблюдения на воспроизведение с помощью дисплеев, тем самым повышая эффективность работы.
