Введение в выбор между инвертированными и флуоресцентными микроскопами
Микроскоп является важным инструментом в культуре клеток и связанных с ними экспериментах с производными. В настоящее время на рынке представлены различные типы микроскопов, и выбор микроскопа, который соответствует потребностям и подходит, является непростой задачей. Ниже мы познакомим вас с принципами работы инвертированных микроскопов и флуоресцентных микроскопов для облегчения выбора.
Состав инвертированного микроскопа такой же, как и у обычного микроскопа, и состоит в основном из трех частей: механической части, осветительной части и оптической части. Состав инвертированного микроскопа такой же, как у обычного прямого микроскопа, за исключением того, что объектив и система освещения перевернуты: первый находится под предметным столиком, а второй — над предметным столиком. Такая конструкция позволяет значительно увеличить эффективное расстояние между системой фокусировки освещения и предметным столиком, что упрощает размещение более толстых инструментов наблюдения, таких как чашки для культивирования и флаконы для клеточных культур (разумеется, также допустимы предметные стекла), при этом рабочее расстояние между линзой объектива и материалом не должно быть очень большим. Инвертированный микроскоп используется в медицинских и медицинских учреждениях, университетах и научно-исследовательских институтах для наблюдения за микроорганизмами, клетками, бактериями, культурами тканей, суспензиями, осадками и т. д. Он позволяет непрерывно наблюдать за процессом размножения и деления клеток и бактерий в культуральной среде и фиксировать любое состояние во время этого процесса. Широко используется в таких областях, как цитология, паразитология, онкология, иммунология, генная инженерия, промышленная микробиология, ботаника и т. д.
Флуоресцентная микроскопия используется для изучения всасывания, транспорта, распределения и локализации веществ внутри клеток. Для испытуемого объекта существует два способа генерации флуоресценции: спонтанная флуоресценция, при которой флуоресценция непосредственно излучается после УФ-облучения; Вторичная флуоресценция возникает, когда наблюдаемый объект обрабатывается флуоресцентными красителями, а затем облучается ультрафиолетовым светом для испускания флуоресценции. Некоторые вещества в клетках, например хлорофилл, под воздействием ультрафиолетового излучения вызывают спонтанную флуоресценцию; Некоторые вещества сами по себе не могут излучать флуоресценцию, но при окрашивании флуоресцентными красителями или флуоресцентными антителами они также могут излучать вторичную флуоресценцию после облучения ультрафиолетовым светом. В флуоресцентном микроскопе используется высокоэффективный точечный источник света, излучающий свет определенной длины волны (ультрафиолетовый свет 365 нм или пурпурно-синий свет 420 нм) через систему цветных фильтров в качестве возбуждающего света, который возбуждает флуоресцентные вещества внутри образца, излучая различные цвета флуоресценции, а затем наблюдает посредством увеличения объектива и окуляра. Таким образом, даже при слабой флуоресценции на сильном фоне его легко распознать и он обладает высокой чувствительностью. Он в основном используется для изучения структуры, функций и химического состава клеток.
