Введение в фазово-контрастную микроскопию
Фазово-контрастный микроскоп — это микроскоп, который преобразует разность фаз (или разность оптического диапазона), возникающую при прохождении света через объект, в изменение амплитуды (интенсивности света). В основном его используют для наблюдения за живыми клетками, неокрашенными срезами тканей или окрашенными образцами, лишенными контраста.
Человеческий глаз может идентифицировать только изменения длины волны (цвета) и амплитуды видимого света, но не изменения фазы. Большинство биологических образцов очень прозрачны, а амплитуда световой волны практически не меняется после ее прохождения, и существует только изменение фазы.
Фазово-контрастная микроскопия по сути превращает разницу оптических диапазонов видимого света, проходящего через образец, в разницу амплитуд, что улучшает контраст между различными структурами и делает различные структуры четко видимыми. Свет, проходящий через образец после преломления, отклонился от первоначального пути света, при этом задерживаясь на 1/4 λ (длина волны), если затем увеличить или уменьшить 1/4 λ, разница оптических дальностей станет 1/2 λ, два луча ось фотосинтеза после вмешательства для усиления амплитуды увеличивается или уменьшается для улучшения контраста.
С конструктивной точки зрения фазово-контрастный микроскоп отличается от обычного оптического микроскопа:
1. кольцеобразная диафрагма с кольцеобразным отверстием диафрагмы, установленная между источником света и концентратором, ее роль состоит в том, чтобы свет, проходящий через концентратор, образовывал полый конус света, фокусируясь на образце.
2. фазовая пластина фазово-контрастного микроскопа в объективе внутри увеличения фазовой пластины с покрытием из фторида магния, роль прямой или дифрагированной задержки фазы света 1/4 λ. Фазовая пластина имеет две области: прямой свет через часть, называемую «сопряженной поверхностью», и дифрагированный свет через часть, называемую «компенсационной поверхностью». Компенсационная поверхность». Фазовая пластина по своему рабочему эффекту делится на два типа:
(1) Фазовая пластинка А +: прямой свет с задержкой 1/4 λ, две группы световых волн, коаксиальная суперпозиция световых волн, увеличение амплитуды, структура образца ярче, чем окружающая среда, образование яркого контраста (или отрицательного контраста). ).
(2) Фазовая пластинка B +: дифрагированный свет задерживается на 1/4 λ, две группы световых волн после слияния оси световой волны уменьшаются, амплитуда становится меньше, структура образца темнее окружающей среды, формирование темного контраста (или положительного контраста). Объектив с фазовой пластинкой называется фазово-контрастным объективом, часто на корпусе объектива имеется надпись «Ph».
