Введение в преимущества и недостатки многофотонной лазерной сканирующей микроскопии
1. Взволнованный красным или инфракрасным светом, рассеяние света невелико, а рассеяние мелких частиц обратно пропорционально четвертой мощности длины волны.
2. Более рассеянные фотоны из поперечного сечения визуализации могут быть собраны без необходимости выходов.
3. Охоты не могут различать рассеянные фотоны, испускаемые из дефокусированных или фокусных областей, и многофотоны имеют лучшее отношение сигнал / шум при глубокой визуализации.
4. Ультрафиолетовый или видимый свет, используемый для одно фотонного возбуждения, легко поглощается и ослабляется образцом, прежде чем луч достигает боковой плоскости, что затрудняет возбуждение глубоких слоев.
5. С точки зрения наблюдения за биологической микроскопией, первым соображением является не повреждать активное состояние самого организма, поддерживать кровообращение воды, концентрации ионов, кислорода и питательных веществ. В области светового наблюдения как тепловая, так и энергия фотонов должна оставаться в дозе облучения и энергии света, которые не повреждают ячейки.
6. Многототонная микроскопия имеет много преимуществ. С точки зрения трехмерного разрешения, инвазии глубины, эффективности рассеяния, фонового света, отношения сигнал / шум, контроля и т. Д., Существуют характеристики, которые предыдущие лазерные микроскопы не обладают или не могут превзойти
Недостатки многофотонного лазерного сканирующего микроскопа:
1. Только для флуоресцентной визуализации.
2. Если образец включает хромофоры, которые могут поглощать свет возбуждения, образец может подвергаться термическому повреждению.
3. Разрешение немного уменьшено, хотя его можно улучшить, одновременно используя конфокальные небольшие отверстия, есть потеря сигнала.
4. Из -за ограничений дорогих сверхбыстрых лазеров стоимость многофотонных сканирующих микроскопов относительно высока.
