Метод прямого подсчета с помощью микробного микроскопа
Экспериментальные этапы (метод прямого подсчета с помощью микробного микроскопа)
1. Разбавление
Разбавьте суспензию пивных дрожжей соответствующим образом. Если бактериальный раствор неконцентрированный, разбавлять его не требуется.
2. Помещение микроскопического исследования и подсчета.
Перед добавлением проб проводят микроскопическое исследование счетной камеры счетной доски. Если есть грязь, ее нужно очистить перед подсчетом.
3. Добавьте образцы
Накройте чистую и сухую пластинку для подсчета клеток крови покровным стеклом, а затем с помощью стерильной пипетки с тонким горлышком капните небольшую каплю (не слишком много) разбавленного дрожжевого раствора с края покровного стекла. Разрешить бактериальному раствору проникнуть в счетную камеру по зазору путем капиллярного проникновения. Обычно счетная камера может быть заполнена бактериальным раствором. Будьте осторожны, чтобы не образовались пузыри.
4. Микроскопический подсчет
Отдохнув в течение 5 минут, поместите доску для подсчета клеток крови на предметный столик микроскопа, сначала используйте микроскоп с низким увеличением, чтобы определить местонахождение комнаты для подсчета, а затем переключитесь на микроскоп с высоким увеличением для подсчета. Если перед подсчетом бактериальный раствор окажется слишком густым или слишком жидким, перед подсчетом разведение следует отрегулировать еще раз. Общее требование к разведению пробы заключается в том, чтобы на одну маленькую клетку приходилось примерно 5-10 бактериальных тел. Выберите для подсчета по 5 ячеек из каждой счетной комнаты (дополнительно 4 угловые и центральные ячейки). Мицелий, расположенный на линии сетки, обычно учитывается только по верхней и правой линиям. Если дрожжи прорастают и размер почки достигает половины материнской клетки, проводят два подсчета бактерий. Для подсчета образца необходимо рассчитать содержание бактерий в образце на основе значений, полученных из двух счетных камер.
5. Очистите доску для подсчета клеток крови.
После использования промойте планшет для подсчета клеток крови струей воды из водопроводного крана. Не используйте для мытья твердые предметы. После мытья высушите его самостоятельно или высушите феном. При микроскопическом исследовании наблюдают, имеются ли в каждой мелкой клетке остаточные бактериальные тельца или другие осадки. Если он грязный, его необходимо промыть несколько раз, пока он не станет чистым.
