Методы подготовки образцов для оптической и электронной микроскопии
Методы микроскопической подготовки обычно включают четыре категории: метод секционирования, метод цельного препарата, метод мазка и метод таблетирования.
①Метод нарезки. Толщина среза оптического микроскопа составляет от 2 до 25 микрон. Обычно толщина среза животного и растительного сырья составляет около 10 микрон. Методы секционирования различаются в зависимости от среды внедрения. Обычно используются метод парафиновых срезов, метод получения срезов из хлопкового коллоида, метод замороженных срезов и метод с использованием этиленгликольметакрилата (называемый методом GMA). Метод парафиновых срезов включает такие этапы, как фиксация, заливка, нарезка срезов, окрашивание, обезвоживание и монтаж. Ключевым моментом является заливка биологического материала в парафин, использование парафина в качестве подложки и разрезание биологического материала, погруженного в восковой блок, на идеальные тонкие ломтики. Процесс операции: фиксация → промывка водой → поэтапное обезвоживание спирта от низкой концентрации до высокой концентрации → прозрачность ксилола → погружение в воск → заливка → секционирование → пластырь → депарафинизация ксилолом → поэтапная обработка спиртом от высокой концентрации до низкой концентрации. Наконец, он переходит к воде → крашению → ступенчатому обезвоживанию от спирта низкой концентрации к спирту высокой концентрации → прозрачности ксилола → запечатыванию смоляным клеем. Основные этапы одинаковы для всех производственных технологий.
②Метод комплексного уплотнения. Метод подготовки цельного препарата для отдельных клеток, крошечных организмов или рассредоточенных органов. Этот метод также требует различных этапов фиксации, окрашивания, обезвоживания, прозрачности и крепления. Этим методом готовят парамеции и ротовой аппарат насекомых.
③Метод мазка. Метод подготовки, при котором легко диспергируемые биологические образцы наносят на предметное стекло. Мазок крови является одним из примеров.
④Метод прессования таблеток. Поместите натуральные и легко диспергируемые ткани или ткани, которые легко диспергируются после обработки, такие как сперматоциты животных и клетки кончика корня, на предметное стекло, добавьте покровное стекло и с силой раздавите ткань, чтобы клетки или клетки оказались внутри. распространение в один слой метода производства. Метод прессования часто применяют для наблюдения за хромосомами, обычно окрашиваемыми пурпурным ацетатом, красным лишайником и карболовым фуксином.
