Некоторые проблемы использования фазово-контрастной микроскопии:
(1) Обращение фазы, когда n '
2. Эффект ореола и постепенного затемнения в процессе визуализации фазово-контрастной микроскопии, когда структура темнеет из-за фазовой задержки, является не потерей света, а результатом перераспределения света в плоскости изображения. Поэтому свет, который явно исчезает в темных областях, будет выглядеть как яркий ореол вокруг более темных объектов. Это недостаток фазово-контрастной микроскопии, затрудняющий наблюдение тонких структур. Когда кольцевое отверстие очень узкое, явление ореола становится более серьезным. Еще одним явлением фазово-контрастной микроскопии является эффект затемнения, под которым понимается уменьшение контраста по краям большей площади с той же фазовой задержкой, что и при фазово-контрастном наблюдении.
(3) Влияние толщины образца. При обнаружении разницы толщина образца должна составлять 5 мкм или меньше. При использовании более толстых образцов верхний слой образца будет прозрачным, а более глубокий слой будет размытым и создаст интерференцию фазового сдвига и интерференцию рассеяния света.
(4) Влияние покровного стекла и предметного стекла на образец должно быть прикрыто покровным стеклом, иначе светлое кольцо кольцевой апертуры и темное кольцо фазовой пластинки будут трудно перекрываться. Дифференциальное наблюдение также предъявляет высокие требования к качеству предметного и покровного стекла. Наличие царапин, неравномерной толщины или неравномерности может привести к искажению яркого кольца и фазовым помехам. Кроме того, если предметное стекло слишком толстое или слишком тонкое, кольцевое отверстие станет больше или меньше.
В настоящее время оптические микроскопы превратились из традиционных биологических микроскопов в различные типы специализированных микроскопов. По принципу формирования изображения их можно разделить на:
① Геометрический оптический микроскоп: включая биологический микроскоп, микроскоп падающего света, инвертированный микроскоп, металлографический микроскоп, микроскоп темного поля и т. д.
② Физический оптический микроскоп: включая фазово-контрастный микроскоп, поляризационный микроскоп, интерференционный микроскоп, фазово-контрастный поляризационный микроскоп, фазово-контрастный интерференционный микроскоп, фазово-контрастный флуоресцентный микроскоп и т. д.
③ Микроскопы для преобразования информации: включая флуоресцентные микроскопы, микроспектрометры, микроскопы для анализа изображений, акустические микроскопы, фотографические микроскопы, телевизионные микроскопы и т. д.
Перечислите несколько применений микроскопов: Биологический микроскоп. Вообще говоря, микроскопы можно разделить на стереомикроскопы и биологические микроскопы. В связи с разными целями и требованиями возникло множество ветвей, но основные принципы остались прежними. Поляризация, фазовый контраст, пропускание и падающий свет до сих пор относятся к биологическим микроскопам. Стереоскопический микроскоп, также известный как анатомический микроскоп, твердый микроскоп и стереомикроскоп, представляет собой универсальный микроскоп. Он прост в эксплуатации, не требует больших требований к образцам, имеет большое рабочее расстояние и обеспечивает четкое ощущение трехмерности при наблюдении. Его можно использовать для наблюдения за физическими объектами или выполнения некоторых операций с образцами во время наблюдения. Вместо того, чтобы нарезать образец, как в биологическом микроскопе, нарезка требует соответствующей технологии и оборудования. Таким образом, стереомикроскопы имеют широкий спектр применения в таких областях, как микроэлектроника, сборка и обслуживание точных инструментов, а также микрогравировка. Широко используемый в анатомии и микрохирургии, в области биологии и медицины (в настоящее время классифицируется как хирургические микроскопы), источником света, применяемым в биологии и медицине, может быть только источник холодного света (волоконно-оптический); Используется в промышленности для наблюдения, сборки, проверки и других работ с мелкими деталями и интегральными схемами. Металлографический микроскоп. Многие любят писать его как «металлографический микроскоп». Металлографический микроскоп — это микроскоп, специально используемый для наблюдения металлографической структуры непрозрачных объектов, таких как металлы и минералы. Эти непрозрачные объекты невозможно наблюдать в обычный просвечивающий микроскоп, поэтому основное отличие их от обычного микроскопа состоит в том, что первый использует отраженный свет, а второй — проходящий свет. В металлографическом микроскопе луч освещения направляется от объектива на поверхность наблюдаемого объекта, отражается от поверхности, а затем возвращается в объектив для получения изображения. Этот метод отражающего освещения также широко используется при обнаружении кремниевых пластин интегральных схем.
