Правильное использование инвертированной флуоресцентной микроскопии
Инвертированный флуоресцентный микроскоп — это многофункциональный микроскоп, используемый в области высокотехнологичных биологических исследований. Его структура сложна и дорога. Таким образом, чтобы аспиранты-медики правильно освоили стандарты работы и использования инвертированного флуоресцентного микроскопа, преподавателям необходимо сначала научить базовым знаниям об инвертированном флуоресцентном микроскопе, прежде чем демонстрировать реальную работу инвертированного флуоресцентного микроскопа. Они должны представить структуру, принцип, функции и основные методы использования инвертированного флуоресцентного микроскопа, а затем продемонстрировать различные функции для разных образцов в конкретных операциях использования, постепенно стандартизируя работу и использование инвертированного флуоресцентного микроскопа для аспирантов-медиков.
1. Правильное использование зрительного наблюдения. Одна из функций инвертированного флуоресцентного микроскопа — наблюдение в ярком поле зрения. Его основной принцип заключается в получении изображения на ярком фоне за счет различного светопоглощения каждой части образца после освещения светом. Он в основном подходит для наблюдения за окрашенными или окрашенными клетками, срезами тканей и другими образцами.
2. Правильное использование дифференциального наблюдения. Вторая функция инвертированного флуоресцентного микроскопа — наблюдение разности фаз. Его основной принцип заключается в преобразовании разности оптических путей различных частей образца в разность амплитуд и наблюдении через объектив разности фаз с фазовой пластинкой и прожектором с круглой апертурой. В основном он подходит для наблюдения за живыми клетками или неокрашенными срезами тканей. В процессе экспериментального обучения, помимо правильного руководства аспирантами-медиками к соблюдению основных методов наблюдения разности фаз, более важно помочь им понять и освоить образцы с использованием наблюдения разности фаз. Для них наиболее часто используемым методом будущих научных исследований является микроскопическое наблюдение за культивируемыми клетками. Во-первых, для выбора клеточного оборудования обычно рекомендуется использовать культуральные чашки, планшеты и флаконы из стекла и пластика. Они в основном бесцветны и прозрачны, и их можно непосредственно наблюдать под инвертированным флуоресцентным микроскопом без необходимости выливать клеточную жидкость или подвергаться другой обработке. Во-вторых, во время микроскопического наблюдения не открывайте случайно крышку оборудования, чтобы не загрязнить клетки. Наконец, операторам следует носить перчатки, маски и белые халаты, чтобы не только защитить свое здоровье, но и предотвратить загрязнение клеток.
3. Правильное использование флуоресцентного наблюдения. Третья функция инвертированного флуоресцентного микроскопа — наблюдение флуоресценции. Его основной принцип заключается в использовании возбуждающего света для возбуждения образца с образованием флуоресценции, тем самым обеспечивая наблюдение формы и положения образца. Он в основном подходит для наблюдения флуоресцентно меченных образцов. Наблюдение флуоресценции - важная функция инвертированной флуоресцентной микроскопии, требующая дорогих аксессуаров и специального использования. Чтобы аспиранты-медики правильно освоили нормы проведения флуоресцентного наблюдения, преподаватели не только обучают их основным методам работы, но, что более важно, учат их уникальности. Во-первых, при подготовке образца поверхность предметного и покровного стекла должна быть гладкой, а толщина должна быть соответствующей (толщина предметного стекла должна быть от 0,8 мм до 1,2 мм, а покровное стекло должно быть около {{5). }}.17 мм); Образец должен иметь соответствующую толщину, избегая при этом перекрытия клеток или маскировки примесей; В качестве герметика следует использовать равную смесь глицерина и карбонатного буфера (0,5 моль/л, pH 9, 0-9,5). Во-вторых, перед наблюдением флуоресценции следует выключить свет в комнате и белый свет инвертированного флуоресцентного микроскопа, чтобы убедиться, что они находятся в темной комнате. Наконец, при наблюдении флуоресценции время наблюдения должно строго контролироваться, обычно 1-2 часов за раз, иначе флуоресценция затухнет и исчезнет; При регулировке источника света следует надевать защитные очки, чтобы избежать повреждения очков ультрафиолетом.
4. Правильное использование захвата изображения. В научных исследованиях требуется не только, чтобы инвертированная флуоресцентная микроскопия могла обеспечить множественные наблюдения, но также чтобы инвертированная флуоресцентная микроскопия могла обеспечить захват изображения. Система инвертированного флуоресцентного микроскопа объединяет оптический микроскоп с компьютером посредством фотоэлектрического преобразования, что позволяет осуществлять не только микроскопические наблюдения с помощью окуляра, но также наблюдение, редактирование и сохранение динамических изображений в реальном времени на компьютере.
