Основы и конструктивные элементы флуоресцентного микроскопа
Флуоресцентная микроскопия использует точку с высокой световой отдачей для излучения света определенной длины волны (например, ультрафиолетового света 3650 дюймов или пурпурно-синего света 4200 дюймов) через систему фильтров в качестве возбуждающего света для возбуждения флуоресцентных веществ в образце для испускания флуоресценции различные цвета После этого наблюдайте через увеличение объектива и окуляра. Таким образом, на сильном контрастном фоне, даже если флуоресценция очень слабая, его легко идентифицировать и он обладает высокой чувствительностью. Он в основном используется для исследования клеточной структуры и функции и химического состава. Базовая структура флуоресцентного микроскопа состоит из обычного оптического микроскопа и некоторых аксессуаров (таких как флуоресцентный источник света, фильтр возбуждения, двухцветный светоделитель, блокирующий фильтр и т. д.). Флуоресцентный источник света — обычно используют ртутную лампу сверхвысокого давления (50-200W), которая может излучать свет с различными длинами волн, но каждое флуоресцентное вещество имеет длину волны возбуждения, при которой наблюдается наиболее сильная флуоресценция, поэтому фильтр возбуждения (как правило, существуют ультрафиолетовые, фиолетовые, синие и зеленые фильтры возбуждения), которые пропускают только возбуждающий свет определенной длины волны и облучают образец, поглощая другой свет. После того, как каждое вещество облучается возбуждающим светом, оно испускает видимую флуоресценцию с большей длиной волны, чем длина волны облучения, за очень короткое время. Флуоресценция специфична и обычно слабее, чем возбуждающий свет. Чтобы наблюдать специфическую флуоресценцию, необходимо добавить блокировку (или подавление) за линзой объектива и использовать ее в сочетании с ней.
Отличие флуоресцентного микроскопа от обычного микроскопа
1. Способ освещения обычно эпископический, т. е. источник света проецируется на образец через объектив;
2. Источник света - ультрафиолетовый свет, длина волны короче, а разрешение выше, чем у обычных микроскопов;
3. Есть два специальных фильтра, один перед источником света используется для фильтрации видимого света, а другой между окуляром и объективом используется для фильтрации ультрафиолетовых лучей для защиты человеческого глаза.
Флуоресцентный микроскоп также является своего рода оптическим микроскопом, основное отличие которого заключается в том, что длина волны возбуждения у них разная. Это определяет разницу между флуоресцентным микроскопом и обычным оптическим микроскопом с точки зрения конструкции и использования.
Флуоресцентная микроскопия является важным инструментом в иммунофлуоресцентной цитохимии. Он состоит из основных компонентов, таких как источник света, система фильтрующих пластин и оптическая система. Это использование определенной длины волны света для возбуждения флуоресценции образца и наблюдения за флуоресцентным изображением образца путем усиления системы объектива и окуляра.
