Существует два типа флуоресцентных микроскопов в зависимости от их оптического пути:
1. Просвечивающий флуоресцентный микроскоп: источник возбуждающего света проходит через материал образца через конденсатор для возбуждения флуоресценции. Обычно используемые коллекторы темного поля или обычные светоколлекторы можно использовать для настройки отражателя для преобразования возбуждающего света и бокового света на образец. Это относительно старомодный флуоресцентный микроскоп. Его преимуществом является то, что флуоресценция сильна при малом увеличении, а недостатком — то, что флуоресценция ослабевает с увеличением увеличения. Поэтому лучше исследовать образцы большего размера.
2. Флуоресцентный микроскоп с падающим лучом. Это новый тип флуоресцентного микроскопа, разработанный в наше время. В отличие от предыдущего, свет возбуждения падает с объектива на поверхность образца, используя тот же объектив, что и конденсор освещения, и объектив для сбора флуоресценции. К оптическому пути необходимо добавить двухцветный сепаратор лучей, который находится под углом 45 градусов к легкому урану. Возбуждающий свет отражается в линзу объектива и концентрируется на образце. Флуоресценция, генерируемая образцом, а также возбуждающий свет, отраженный от поверхности линзы объектива и покровного стекла, одновременно попадают в линзу объектива и возвращаются в сепаратор дихроичного луча, разделяя возбуждение и флуоресценцию. Остаточное возбуждение затем поглощается блокирующим фильтром. Если используются различные комбинации фильтров возбуждения/сепараторов двухцветных лучей/блокирующих фильтров, они могут удовлетворить потребности различных продуктов флуоресцентной реакции. Преимущество этого флуоресцентного микроскопа заключается в том, что поле зрения освещено равномерно, изображение четкое, а чем больше увеличение, тем сильнее флуоресценция.
（2） Использование флуоресцентного микроскопа
1. Включите источник света, и ртутную лампу сверхвысокого давления необходимо предварительно нагреть в течение нескольких минут, чтобы достичь своего пика.
2. Для трансмиссионного флуоресцентного микроскопа между источником лампы и конденсором необходимо установить необходимый фильтр возбуждения, а за объективом установить соответствующий блокирующий фильтр. Флуоресцентный микроскоп с падающим лучом должен вставить необходимый фильтр возбуждения/двухцветный сепаратор луча/блокирующий фильтр в паз оптического пути.
3. Наблюдать в маломощный микроскоп и отрегулировать центр источника света по юстировочным устройствам разных моделей флуоресцентных микроскопов так, чтобы он располагался в центре всего пятна освещения.
4. Разместите кусочки образца и сфокусируйте их для наблюдения. Во время использования следует отметить, что за фильтром конечной очистки нельзя смотреть прямо в глаза, чтобы избежать повреждения глаз; При наблюдении образцов с помощью масляного микроскопа необходимо использовать специальный нефлуоресцентный масляный микроскоп; После выключения ртутной лампы высокого давления ее нельзя сразу включить снова. Для повторного запуска требуется 5 минут, иначе он будет работать нестабильно и повлияет на срок службы ртутной лампы.
（3） Наблюдая под флуоресцентным микроскопом на учебной платформе с использованием сине-фиолетового светофильтра, можно увидеть, что клетки, окрашенные 0,01-процентным акридиновым оранжевым флуоресцентным красителем, ядро и цитоплазма стимулируются к выработке двух разных цвета флуоресценции (темно-зеленый и оранжево-красный).
