Существует два типа флуоресцентных микроскопов в зависимости от их светового пути.
1. Просвечивающий флуоресцентный микроскоп: источник возбуждающего света проходит через материал образца через конденсатор для возбуждения флуоресценции. Обычно используется темнопольный коллектор или можно использовать обычный коллектор, а отражатель настраивается так, чтобы отклонять и излучать в сторону образец возбуждающего света. Это старый флуоресцентный микроскоп. Преимущество состоит в том, что флуоресценция сильна при малом увеличении, но недостатком является то, что флуоресценция ослабевает с увеличением увеличения. Поэтому лучше наблюдать образцы большего размера.
2. Эпи-флуоресцентный микроскоп — это новый тип флуоресцентного микроскопа, разработанный в наше время. Отличие от вышеизложенного состоит в том, что возбуждающий свет падает вниз от объектива к поверхности образца, то есть в качестве конденсора освещения и объектива для сбора флуоресценции используется один и тот же объектив. К оптическому пути необходимо добавить двухцветный светоделитель, который составляет 45% от оптического урана. Угол: возбуждающий свет отражается в линзу объектива и концентрируется на образце. Флуоресценция, генерируемая образцом, и свет возбуждения, отраженный поверхностью линзы объектива и поверхностью покровного стекла, одновременно входят в линзу объектива и возвращаются в дихроматический светоделитель, так что свет возбуждения отделяется от флуоресценции, остаточное возбуждение затем свет поглощается блокирующим фильтром. Если вы используете различные комбинированные вставки фильтра возбуждения/двухцветного светоделителя/блокирующего фильтра, вы можете удовлетворить потребности различных продуктов реакции флуоресценции. Преимущество такого типа флуоресцентного микроскопа в том, что поле зрения освещено равномерно, изображение четкое, причем чем больше увеличение, тем сильнее флуоресценция.
(2) Как использовать флуоресцентный микроскоп.
1. Включите источник света, и ртутная лампа сверхвысокого давления должна нагреться в течение нескольких минут, чтобы достичь максимальной яркости.
2. Для просвечивающих флуоресцентных микроскопов между источником света и конденсором должен быть установлен необходимый фильтр возбуждения, а за объективом — соответствующий блокирующий фильтр. В эпифлуоресцентных микроскопах необходимо вставить необходимый фильтр возбуждения/двухцветный светоделитель/блокирующий фильтр в паз светового пути.
3. Для наблюдения используйте микроскоп малого увеличения и отрегулируйте центр источника света в соответствии с регулировочными устройствами разных моделей флуоресцентных микроскопов так, чтобы он располагался в центре всего пятна освещения.
4. Поместите образец и настройте фокус для наблюдения. Пожалуйста, обратите внимание во время использования: не смотрите на фильтр прямо глазами, чтобы избежать повреждения глаз; при наблюдении препарата через масляную линзу необходимо использовать специальную нефлуоресцентную масляную линзу; ртутную лампу высокого давления нельзя повторно открывать сразу после ее выключения. Ее можно запустить снова через 5 минут, иначе она будет нестабильной и повлияет на срок службы ртутной лампы.
(3) Наблюдайте под флуоресцентным микроскопом на обучающей платформе, используя сине-фиолетовый светофильтр. Видно, что проход о. В клетках, окрашенных 01% флуоресцентным красителем акридинового оранжевого, ядро и цитоплазма возбуждаются, создавая флуоресценцию двух разных цветов (темно-зеленый и оранжево-красный).
