Право биофлуоресцентного микроскопа
Принцип флуоресцентной микроскопии заключается в использовании высокоэффективного источника точечного света (такого как ультра-высокое давление ртуть) для излучения определенной длины волны света (например, ультрафиолетового света 3650 λ или фиолетового синего света 4200 λ) через систему цветовых фильтров в качестве света возбуждения, который возбуждает флуоресцентные вещества в уриентировании, чтобы эмить цветов флуктора. Затем он фильтруется блокирующим (или подавляющим) фильтром за объективной линзой и наблюдается посредством увеличительного эффекта окуляра.
Фильтр блокировки имеет две функции: во -первых, он впитывает и блокирует возбуждение света от входа в окуляр, чтобы не мешать флуоресценции и повредить глаза; Второе - выбирать и разрешить удельной флуоресценции проходить, демонстрируя конкретный флуоресцентный цвет.
Флуоресцентные микроскопы можно разделить на два типа на основе принципа светового пути:
1. Прописывающий флуоресцентный микроскоп
Более старые флуоресцентные микроскопы используют прожектор для возбуждения флуоресценции, передавая источник света возбуждения через материал образца. Его преимущество - сильная флуоресценция при низком увеличении, но его недостаток заключается в том, что его флуоресценция уменьшается с увеличением увеличения. Таким образом, он подходит только для наблюдения за более крупными материалами образца.
2. Флуоресцентный микроскоп падающего света
Свет возбуждения падает с объективного линзы на поверхность образца, используя ту же объективную линзу, что и конденсатор освещения и объектив -объектив для сбора флуоресценции.
Сплиттер с двойным цветовым пучком (дихроичное зеркало) необходимо добавить к оптическому пути, который образует угол 45 градусов с оптической осью. Свет возбуждения отражается в объективной линзе и сфокусирован на образце. Флуоресценция, генерируемая образцом, а также свет возбуждения, отражаемый от поверхности объективного линзы и покрытия стекла, одновременно входит в объектив и возвращается к двойному цветовому лучевому сплитеру, чтобы отделить свет возбуждения и флуоресценцию. Остаточный свет возбуждения затем блокируется поглощением фильтра. Если используются различные комбинации фильтров возбуждения, двойного цветового луча и блокирующих фильтров, они могут удовлетворить потребности различных продуктов флуоресцентной реакции.
Преимущества этого флуоресцентного микроскопа - это равномерное освещение поля, четкая визуализация и более сильная флуоресценция с большим увеличением.
