Что отличает фазово-контрастный микроскоп от обычного микроскопа?
Когда свет проходит через относительно прозрачный образец, ни длина волны (цвет), ни амплитуда (яркость) света заметно не изменяются. Поэтому при наблюдении неокрашенных образцов (например, живых клеток) с помощью обычной световой микроскопии их морфологию и внутреннюю структуру часто трудно различить. Однако из-за различия показателя преломления и толщины различных частей кюветы при прохождении света через такой образец оптический путь прямого и дифрагированного света будет разным. По мере увеличения или уменьшения оптического расстояния изменяется фаза ускоряющихся или отстающих световых волн (создавая разность фаз). Разность фаз света нельзя почувствовать невооруженным глазом, но фазово-контрастный микроскоп может использовать явление интерференции света через свое специальное устройство - кольцевую диафрагму и фазовую пластинку, для преобразования разности фаз света в разность амплитуд (света и темные), которые могут быть восприняты человеческими глазами Плохо), так что исходные прозрачные объекты показывают очевидные различия в светотени, а контрастность усиливается, так что мы можем четко наблюдать живые клетки и клетки в клетках, которые не видны или отчетливо видны в обычные световые микроскопы и микроскопы с темным полем. некоторые тонкие структуры.
Принцип визуализации фазово-контрастного микроскопа: во время осмотра микроскопа источник света может проходить только через прозрачное кольцо кольцевой диафрагмы, а затем после прохождения через конденсор сходится в пучок. Степень отклонения (дифракция). Изображение, формируемое прозрачным кольцом, как раз падает на заднюю фокальную плоскость объектива и совпадает с сопряженной плоскостью на фазовой пластинке. Таким образом, неотклоненный прямой свет проходит через сопряженную плоскость, а отклоненный дифрагированный свет проходит через компенсационную плоскость. Из-за разных свойств сопряженной поверхности и поверхности компенсации на фазовой пластине они будут создавать определенную разность фаз и ослаблять интенсивность света, проходящего через две части соответственно, и две группы света будут сходиться на одной и той же оптический путь после схождения задней линзы. Прямой свет и дифрагированный свет создают интерференцию света, и разность фаз превращается в разность амплитуд. Таким образом, при осмотре в фазово-контрастном микроскопе свет, проходящий через бесцветное прозрачное тело, преобразует разность фаз, неразличимую человеческим глазом, в разность амплитуд (разницу света и темноты), которую может различить человеческий глаз.
