Что такое темнопольная микроскопия? Насколько маленькой можно увидеть клетку?
Темнопольный микроскоп — это разновидность оптического микроскопа, также называемого ультрамикроскопом. В центре конденсора темнопольного микроскопа имеется световой экран, благодаря которому свет освещения не попадает непосредственно в хрусталик человека. В объектив попадает только свет, отраженный и преломленный образцом. Поэтому фон поля зрения черный, а края объектов яркие. из. Этот тип микроскопа может видеть частицы размером от 4 до 200 нм, а разрешение может быть в 50 раз выше, чем у обычных микроскопов.
принцип
Микроскоп темного поля модифицирован на основе структуры обычного оптического микроскопа с использованием принципа оптического эффекта Тиндаля. Конденсоры темного поля позволяют блокировать центральный луч источника света. Невозможно войти в объектив через образец снизу вверх. В результате свет меняет свой путь и падает на наблюдаемый образец под углом. Образец отражается или рассеивается при попадании на свет. Рассеянный свет попадает в объектив, поэтому все поле зрения затемняется.
Основным принципом темнопольной микроскопии является эффект Тиндаля. Когда луч света проходит через темную комнату, в воздухе можно наблюдать яркую пылевую «дорожку» со стороны, перпендикулярной падающему свету. Это явление – эффект Тиндаля. После замены темнопольного микроскопа темнопольным конденсором на обычном оптическом микроскопе из-за перекрытия внутренней параболической структуры конденсора свет, падающий на поверхность проверяемого объекта, не может напрямую попасть в объектив. линзы и окуляра, и сквозь них может проходить только рассеянный свет, что уменьшает поле зрения. темно. Поскольку темнопольный микроскоп не излучает прозрачный свет в систему прямого наблюдения, при отсутствии объекта поле зрения темное и наблюдать какой-либо объект невозможно; когда есть объект, свет, преломленный им обратно, и рассеянный свет ярко видны на темном фоне. . При наблюдении объекта в темном поле большая часть света освещения преломляется. В зависимости от местоположения, структуры и толщины объекта (образца) рассеяние и преломление света сильно различаются.
Структура и модификация
Базовая структура темнопольного микроскопа представляет собой обычный оптический набор микроскопа плюс световой барьер. Обычный микроскоп можно переоборудовать в темнопольный микроскоп при условии, что конденсор является съемным, а диаметр кронштейна подходит для установки темнопольного конденсора. При отсутствии конденсора темного поля можно из плотной черной бумаги сделать центральный световой экран и поместить его на рамку фильтра под конденсор обычного микроскопа, чтобы получить эффект темного поля. Световой экран используется для блокировки света в центре источника света, чтобы свет мог проникать в образец только из окружающей среды. Размер примерно такой же, как размер диафрагмы. При разном увеличении используются разные апертуры, поэтому необходимо создавать разные световые блоки.
Практическое применение
Микроскопию темного поля часто используют для наблюдения неокрашенных прозрачных образцов. Поскольку эти образцы имеют показатель преломления, аналогичный показателю преломления окружающей среды, их трудно ясно увидеть в обычных условиях яркого поля. Поэтому условия темного поля используются для улучшения контраста между самим образцом и фоном. Этот вид микроскопа может видеть частицы размером от 4 до 200 нм. Он может видеть только существование, движение и характеристики поверхности объекта, но не может различить тонкую структуру объекта. В клинической практике для исследования бледных спирохет обычно используется темнопольная микроскопия. Это тест на возбудитель, который имеет большое значение для диагностики раннего сифилиса.
