Почему увеличение масляной линзы больше, чем увеличение обычного объектива?
Причины, по которым бактерии необходимо фиксировать перед окрашиванием в микробиологических экспериментах:
1: Уничтожьте клетки и облегчите окрашивание красителя.
Второе: сделать так, чтобы бактерии прилипли к предметному стеклу и не смывались водой.
При фиксации сушите медленно. Если очень хочется ускорить процесс, можно несколько раз подсушить на расстоянии над пламенем спиртовки. Не сушите стекло так, чтобы оно нагревалось, иначе оно может уничтожить бактериальную форму жизни.
Окраска по Граму и микроскопическое наблюдение бактерий
Экспериментальный принцип
Принцип окрашивания по Граму. Различные реакции бактерий на окрашивание по Граму обусловлены разным составом и строением их клеточных стенок. Клеточная стенка грамположительных бактерий представляет собой преимущественно сеть пептидогликанов. При обработке этанолом размер пор сетчатой структуры становится меньше из-за дегидратации, а проницаемость снижается, тем самым вызывая образование комплекса кристаллический фиолетовый-йод. Вещество трудно элюируется и остается в клетках. После обесцвечивания и докрашивания сине-фиолетовый цвет основного красителя сохраняется. Слой пептидогликана клеточной стенки грамотрицательных бактерий тонкий и имеет высокое содержание липидов. Следовательно, во время обесцвечивания липиды растворяются этанолом (или ацетоном), и проницаемость клеточной стенки увеличивается, в результате чего комплекс кристаллического фиолетового с йодом сравнительно легко вымывается. После докраски контрастным красителем клетки окрашиваются в красный цвет контрастного красителя. Принцип получения изображения с помощью микроскопа. В современных обычных оптических микроскопах для увеличения изображения используются две системы линз: окуляры и объективы, поэтому их часто называют составными микроскопами. В оптической системе микроскопа важнейшее значение имеет качество объектива. Масляная линза имеет наибольшее увеличение и имеет наибольшее значение для микробиологических исследований. Основная цель добавления капель масла для линз между предметным стеклом и линзой — увеличение яркости освещения и повышение разрешающей способности микроскопа. Использование масла вместо воздуха в качестве среды распространения света уменьшает преломление или полное отражение света, делая наблюдаемое изображение более четким.
Найдите колонии бактерий, которые нужно наблюдать под микроскопом с малым увеличением (продолжайте перемещать предметное стекло, если почувствуете красную тень, немедленно остановитесь, отрегулируйте увеличение, если это не колония, продолжайте смотреть), поднимите оправу объектива. , а затем переключитесь на масляную линзу. Добавьте каплю кедрового масла в область образца и с помощью регулятора грубой настройки осторожно опустите оправу линзы так, чтобы масляная линза была погружена в масло для линз и почти соприкасалась с образцом. Поднимите конденсор в самое верхнее положение и откройте диафрагму. С помощью грубого регулятора медленно поднимайте оправу объектива до тех пор, пока изображение объекта не появится в поле зрения, а затем с помощью точного регулятора сделайте его четким и сфокусированным.
