Подробно описать этапы и методы выбора флуоресцентных зондов для конфокальной микроскопии.
В экспериментах с конфокальными микроскопами некоторые экспериментальные индикаторы могут быть обнаружены с помощью аутофлуоресценции самого образца или экзогенных веществ, но большинство испытуемых веществ не имеют измеримой флуоресценции и нуждаются в мечении флуоресцентными зондами. Он имеет измеримый флуоресцентный сигнал. Итак, как выбрать флуоресцентные зонды для конфокальной микроскопии?
1. Определить тестируемые показатели в соответствии с целью эксперимента.
После определения индекса обнаружения также определяется диапазон выбора флуоресцентных зондов. Видно, что выбор флуоресцентного зонда для использования в эксперименте определяется целью эксперимента. Например, если целью эксперимента является изучение изменений ионов кальция в кардиомиоцитах при возникновении мерцательной аритмии, то можно определить, что тестируемым веществом являются ионы кальция в кардиомиоцитах, а диапазон выбора флуоресцентных зондов ограничен зонды с ионами кальция, которые могут метить живые клетки. Иголка.
2. Определите диапазон доступных флуоресцентных зондов
Для новых экспериментальных веществ или индикаторов, если целью эксперимента не является изучение новых флуоресцентных зондов, вы можете применить зрелые зонды и методы маркировки. Тип или диапазон флуоресцентных зондов, которые могут маркировать тестируемое вещество, можно определить путем поиска в авторитетной литературе или каталогах продукции известных компаний-производителей реагентов в стране и за рубежом.
3. Проверьте, соответствуют ли характеристики флуоресцентного зонда требованиям к подготовке флуоресцентных образцов.
Характеристики флуоресцентных зондов напрямую влияют на маркировку образцов и результаты экспериментов. Поэтому, прежде чем выбирать флуоресцентные зонды и маркировать образцы в эксперименте, необходимо полностью понять их флуоресцентные характеристики. Характеристики флуоресцентных зондов, подлежащих исследованию, включают:
1. Реакционные характеристики световых зондов и образцов
2. Чувствительность и интенсивность флуоресценции флуоресцентных зондов.
3. Спектральные свойства образцов, меченных флуоресцентными зондами.
4. Стабильность флуоресценции
5. Взаимодействие множественной флуоресценции в образце
