Способ изготовления предметных стекол для микроскопа
Существует три метода изготовления предметных стекол для микроскопа:
1. Метод мазка
Метод мазка – метод приготовления, при котором материал равномерно распределяется по предметному стеклу.
В состав мазков входят одноклеточные организмы, мелкие водоросли, кровь, культуры бактерий, рыхлые ткани растений и животных, гнезда сперматозоидов, пыльники и др.
При нанесении следует обратить внимание на:
(1) Слайд должен быть чистым.
(2) Слайд следует держать ровно.
3) Покрытие должно быть равномерным. Нанесите каплю покрывающей жидкости справа от центра предметного стекла и хорошо распределите ее лезвием препаровального ножа или зубочисткой и т. д.
4) Покрытие должно быть тонким. Используйте другое предметное стекло в качестве толкателя, аккуратно надавите справа налево вдоль поверхности предметного стекла с каплей аппликационного раствора (угол между двумя предметными стеклами должен составлять от 30 до 45 градусов) и нанесите равномерный тонкий слой.
5) Фиксация. Если необходима фиксация, используйте химический фиксатор или высушивающую (бактериальную) фиксацию.
6) Окрашивание. Используйте метиленовый синий для бактерий и краситель Рэйчел для крови. Красящий раствор должен покрывать всю покрываемую поверхность.
7) Промыть. Впитать впитывающей бумагой или высушить.
8) Запечатайте пленку. Для длительного хранения используйте пленку из канадского дерева.
2. Метод прессования пленки
Метод пленки под давлением заключается в том, что биологический материал помещается между предметным стеклом и покровным листом, при приложении определенного давления клетки ткани раздавливаются методом подготовки.
(1) взять материал. Наблюдение за делением клеток, в качестве материала следует выбирать обильные, свежие клетки тканей. Такие как кончики корней, меристематическая ткань кончика стебля, клетки костного мозга, пыльники (материнские клетки пыльцы). Гнездо спермы (сперматогонии) и так далее.
(2) Фиксация. Фиксация материала может быть определена в соответствии с необходимостью, сразу после наблюдения за пленкой давления материала, не может быть проведена отдельная фиксированная обработка (и синхронное окрашивание); брать материал не сразу после осмотра, материал можно зафиксировать фиксатором (обычно спиртоацетатным фиксатором). Фиксированное время от 2 до 24 часов (в зависимости от материала) после промывки 95% этанолом, консервация в 70% этаноле, режим ожидания.
(3) Диссоциация. Клетки нелегко диспергировать материал с помощью гидролизного разделительного раствора (например, 1 н. HCl или соляной кислоты и спиртового раствора), общая обработка 6 ~ 20 минут, после диссоциации и промывки водой перед окрашиванием.
(4) Окрашивание. Существует много видов пятен. Наблюдение за хромосомами обычно используется для окрашивания красящим раствором ацетата пурпурного цвета.
(5) Прессование пленки. Поместите материал на предметное стекло, добавьте каплю воды или красящего раствора, накройте покровным стеклом и аккуратно нажмите на предметное стекло большим пальцем.
(6) Наблюдение. После прессования пленки ее можно наблюдать под микроскопом.
