Процесс изготовления парафиновых срезов для световой микроскопии
Чтобы получить лучшую контрастность зеркального изображения, избыточный рассеянный свет должен быть максимально защищен от попадания в поле зеркала наблюдения или область изображения. При наблюдении через окуляр с объективами разного увеличения поле зрения диафрагмы можно регулировать, формируя стыковочное или слегка соответствующее зеркальному полю окуляра. Позже; в микрофотографии или цифровых ПЗС-изображениях диафрагма поля зрения может быть уменьшена в соответствии с рамкой видоискателя и областью ПЗС-изображения, но не слишком сильно, чтобы не обрезать угол фотографии. При использовании масляной линзы ее также можно правильно уменьшить.
Числовая настройка апертуры конденсатора
Прежде всего, диапазон числовой апертуры (ЧА) конденсорной линзы должен быть в основном равен значению ЧА линзы объектива и отмечен шкалой ЧА. Для микроскопического исследования с большим увеличением необходимо долить масло до верха. Функция апертурного конденсора состоит в обеспечении эффективного сфокусированного проецируемого света, соответствующего числовой апертуре объектива. Если числовая апертура конденсорной линзы больше, чем числовая апертура объектива, часть света будет потеряна. Если числовая апертура конденсорной линзы установлена слишком маленькой, проецируемого света будет недостаточно, и из-за изменения угла выхода часть света будет падать на образец под углом и казаться дифрагированной. Зеркалирование, оба уменьшают разрешение зеркалирования. Поэтому следует соблюдать определенные соответствующие принципы настройки. Эмпирическое значение корректируется в пределах 80--100 процентов от числовой апертуры соответствующего объектива во время осмотра под микроскопом. Рекомендуется установить его на 60-80 процентов или 70 процентов, чтобы получить более подходящий контраст и глубину резкости во время фотосъемки. - 80 процентов . Это означает, что каждый раз, когда вы переключаетесь между объективами с разным увеличением, вам необходимо вносить соответствующие корректировки. На практике вы также можете выполнять точную настройку в зависимости от толщины образца и глубины окрашивания.
Плохая коррекция покрытия, толщина стандартного покровного стекла составляет {{0}},17 мм, а толщина предметного стекла - 1,0 мм. Из-за использования покровного стекла или предметного стекла, которые не соответствуют стандарту, а также из-за неравномерной толщины среза и монтажного материала, возникнет разница в покрытии, что сильно повлияет на линзу объектива NA. зеркальное качество изображения. Чтобы исправить плохое покрытие, на интерферометрическом объективе с увеличением 40x, 60x или 20x разработано корректирующее кольцо (CC). Диапазон коррекции обычно составляет 0,11--0,23 мм, а объектив с большим рабочим расстоянием может достигать 2,0 мм. Вы должны тщательно усвоить основы настройки CC, в противном случае это вызовет проблемы, особенно когда предыдущий экспериментатор выполнил калибровку, а охват выборки следующего экспериментатора непостоянен. путь,
Сначала выберите CC и совместите линию значения 0.17 с сеткой позиционирования и посмотрите, можно ли четко сфокусировать зеркальное отражение. Если изображение не очень четкое, поворачивайте кольцо CC влево и вправо до тех пор, пока зеркальное изображение не достигнет наилучшего качества, и настаивайте на замене образца каждый раз. Коррекция покрытия и регулировка должны выполняться каждый раз, чтобы обеспечить качество микроскопического осмотра.
