Правильное использование инвертированного флуоресцентного микроскопа
Инвертированный флуоресцентный микроскоп — это многофункциональный микроскоп, используемый в области высокотехнологичных биологических исследований. Его структура сложна и дорога. Поэтому, чтобы аспиранты-медики правильно поняли работу и использование инвертированного флуоресцентного микроскопа, преподаватели должны сначала продемонстрировать реальную работу инвертированного флуоресцентного микроскопа. Ранее был создан курс для изучения базовых знаний об инвертированных флуоресцентных микроскопах, знакомство со структурой, принципом, функциями и основными методами использования инвертированных флуоресцентных микроскопов, а затем в конкретных операциях для разных образцов демонстрация различных функций, от мелких к глубокому, постепенно. Стандартизировать использование инвертированных флуоресцентных микроскопов аспирантами-медиками.
1. Правильное использование наблюдения в светлом поле. Одной из функций инвертированного флуоресцентного микроскопа является наблюдение в светлом поле. Основной принцип заключается в том, что после облучения образца светом поглощение света каждой частью различно для реализации изображения на ярком фоне. Он в основном подходит для окрашенных или окрашенных клеток, наблюдения за образцами, такими как срезы тканей.
2. Правильное использование фазово-контрастного наблюдения. Второй функцией инвертированного флуоресцентного микроскопа является фазово-контрастное наблюдение. Его основной принцип заключается в преобразовании разности оптических путей различных частей образца в разность амплитуд. Наблюдение осуществляется через фазоконтрастный объектив с фазовой пластинкой и конденсор с кольцевой диафрагмой. Это в основном применимо для наблюдения за живыми клетками или неокрашенными срезами тканей в процессе экспериментального обучения, в дополнение к правильному руководству аспирантов-медиков для наблюдения за основными методами работы фазово-контрастного наблюдения, более важно направлять их к понимать и осваивать образцы, используемые для фазово-контрастного наблюдения. Для них микроскопическое наблюдение культивируемых клеток является наиболее часто используемым в будущих научных исследованиях. Прежде всего, для выбора клеточного оборудования обычно рекомендуется использовать стеклянные и пластиковые чашки для культивирования, планшеты для культивирования и флаконы для культивирования. Большинство из них бесцветны и прозрачны, и их можно наблюдать непосредственно в инвертированном флуоресцентном микроскопе без слива клеточной жидкости и других обработок. Во-вторых, при микроскопическом наблюдении не открывать по желанию крышку оборудования, чтобы не загрязнить клетки. Наконец, операторам необходимо носить перчатки, маски и белые халаты, которые могут не только защитить их собственное здоровье, но и предотвратить загрязнение клеток.
3. Правильное использование флуоресцентного наблюдения. Третьей функцией инвертированного флуоресцентного микроскопа является наблюдение флуоресценции. Основной принцип заключается в использовании возбуждающего света для возбуждения образца для генерации флуоресценции, чтобы реализовать наблюдение за формой и положением образца. Он в основном подходит для наблюдения за флуоресцентно меченными образцами. Наблюдение за флуоресценцией является важной функцией инвертированного флуоресцентного микроскопа, а его аксессуары дороги и специфичны для использования. Чтобы аспиранты-медики правильно поняли принцип работы и использование наблюдения флуоресценции, преподаватели должны не только научить их основным методам операции, но, что более важно, научить их овладевать ее особенностями. Прежде всего, при подготовке образцов предметное и покровное стекла должны иметь гладкую поверхность и соответствующую толщину (предметное стекло должно быть от 0,8 мм до 1,2 мм, а покровное стекло должно быть примерно { {5}}.17мм); образец должен иметь соответствующую толщину и не допускать перекрывания клеток или маскировки примесями; в среде заливки следует использовать смесь равных объемов глицерина и карбонатного буфера (0,5 моль/л, pH 9,0-9,5). Во-вторых, перед люминесцентным наблюдением следует выключить электрический свет в комнате и белый свет инвертированного люминесцентного микроскопа, чтобы обеспечить обстановку в темной комнате. Наконец, при наблюдении флуоресценции время наблюдения должно строго контролироваться, как правило, подходит 1-2 часов/время, в противном случае флуоресценция затухнет и исчезнет; при регулировке источника света надевайте защитные очки во избежание повреждения очков ультрафиолетовыми лучами.
4. Правильное использование захвата изображения. В научных исследованиях требуется, чтобы инвертированный флуоресцентный микроскоп не только мог осуществлять различные наблюдения, но также требовал, чтобы инвертированный флуоресцентный микроскоп мог осуществлять захват изображения. Система инвертированного флуоресцентного микроскопа объединяет оптический микроскоп с компьютером посредством фотоэлектрического преобразования не только для микроскопического наблюдения в окуляр, но и для динамического наблюдения изображения в реальном времени, редактирования и сохранения на компьютере.
