Основные принципы работы фазово-контрастного микроскопа
Фазово-контрастный микроскоп — это особый тип микроскопа, который преобразует разность распространения света (т. е. разность фаз), возникающую при прохождении света через детали прозрачного образца, в разницу в интенсивности света.
Когда свет проходит через относительно прозрачный образец, не происходит существенного изменения длины волны (цвета) или амплитуды (яркости) света. В результате морфологию и внутреннюю структуру неокрашенных образцов (например, живых клеток) часто трудно различить при просмотре в обычный световой микроскоп. Однако из-за различий в показателе преломления и толщине различных частей кюветы существует разница в оптическом диапазоне прямого и дифрагированного света при прохождении через такой образец. По мере увеличения или уменьшения дальности света изменяется фаза ускоренных или запаздывающих световых волн (создавая разность фаз). Разность фаз света не ощущается человеческим глазом, но фазово-контрастный микроскоп может использовать явление интерференции света с помощью своих специальных устройств — кольцевой диафрагмы и фазовой пластинки — для преобразования разности фаз света в разность фаз. амплитуда (свет и тьма), которую может воспринимать человеческий глаз, благодаря чему исходные прозрачные объекты демонстрируют очевидные различия между светом и тьмой и повышают контраст, чтобы мы могли Контраст увеличивается, чтобы мы могли более четко наблюдать живое клетки и некоторые тонкие структуры внутри клеток, которые невозможно увидеть под обычным оптическим микроскопом и темнопольным микроскопом или не видно четко.
Принцип изображения фазово-контрастного микроскопа: при осмотре в зеркало источник света может пройти только через прозрачное кольцо кольцевой диафрагмы, а затем сходиться в луч света после концентратора, когда этот луч света проходит через обследуемый объект , из-за разницы в дальности действия различных частей света свет отклоняется в разной степени (дифракция). Так как изображение, формируемое прозрачным кольцом, попадает точно в фокальную плоскость после перекрытия линзы объектива и сопряженной поверхности фазовой пластинки. В результате прямой свет, не отклоняясь, проходит через сопряженную плоскость, а дифрагированный свет, отклоняясь, проходит через плоскость компенсации. Из-за сопряженной поверхности на фазовой пластине и компенсации разной природы поверхности они будут проходить через эти две части света, создавая определенную разность фаз и интенсивность затухания двух групп света, а затем после схождение линзы, а затем обратно в том же путешествии света, так что прямой свет и дифрагированный свет создают световую интерференцию, изменяя разность фаз на разницу в амплитуде. Таким образом, при проверке фазово-контрастным микроскопом свет, проходящий через бесцветное прозрачное тело, делает человеческий глаз неразличимой разницей фаз, и человеческий глаз может различить разницу амплитуд (разница света и темноты).
