Разница между двухфотонной микроскопией и лазерной конфокальной микроскопией
Лазерный конфокальный микроскоп представляет собой совокупность систем наблюдения, анализа и вывода, в которых в качестве источника света используется лазер, принцип сопряженной фокусировки и устройство на базе традиционного оптического микроскопа, а также цифровая обработка изображения наблюдаемого объекта с помощью компьютера. К основным системам относятся лазерные источники света, автоматические микроскопы, сканирующие модули (в том числе конфокальные оптические каналы и диафрагмы, сканирующие зеркала, детекторы), цифровые сигнальные процессоры, компьютеры и устройства вывода изображения (дисплеи, цветные принтеры). С помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа можно выполнить томографию и визуализацию наблюдаемого образца. Следовательно, можно наблюдать и анализировать трехмерную пространственную структуру клеток без повреждений.
В то же время лазерная сканирующая конфокальная микроскопия также является мощным инструментом для динамического наблюдения за живыми клетками, множественного иммунофлуоресцентного мечения и ионно-флуоресцентного мечения. Он точно анализирует суть спектра и различает сигналы разных меток с сильно перекрывающимися спектрами излучения.
Самое главное, что при многоцветном флуоресцентном окрашивании можно полностью устранить влияние перекрестных помех флуоресценции, сводя при этом к минимуму потери сигнала флуоресценции образца. Это все, чего не могут достичь обычные зеркала.
Соотношение фокусных расстояний между объективом микроскопа и окуляром
Различные принципы
1. Флуоресцентный микроскоп: он использует ультрафиолетовый свет в качестве источника света для освещения испытуемого объекта, заставляя его излучать флуоресценцию, а затем наблюдает за формой и положением объекта под микроскопом.
2. Лазерный конфокальный микроскоп: на основе изображений флуоресцентной микроскопии устанавливается лазерное сканирующее устройство для возбуждения флуоресцентных зондов ультрафиолетовым или видимым светом.
Различные характеристики
1. Флуоресцентный микроскоп: используется для изучения поглощения, транспорта, распределения и локализации веществ внутри клеток. Некоторые вещества в клетках, например хлорофилл, могут излучать флуоресценцию после воздействия ультрафиолетового излучения; Некоторые вещества сами по себе могут не излучать флуоресценцию, но при окраске флуоресцентными красителями или флуоресцентными антителами они также могут излучать флуоресценцию под действием ультрафиолетового излучения.
2. Лазерный конфокальный микроскоп: использование компьютера для обработки изображений для получения флуоресцентных изображений внутренней микроструктуры клеток или тканей и наблюдения за физиологическими сигналами, такими как Ca2+, значение pH, мембранный потенциал и изменения в морфологии клеток. на субклеточном уровне.
