Метод приготовления предметных стекол
1. Метод мазка
Метод размазывания — это метод приготовления предметных стекол путем равномерного нанесения на них материалов.
Мазки включают одноклеточные-организмы, мелкие водоросли, кровь, питательные среды бактерий, рыхлые ткани животных и растений, семенники, пыльники и т. д.
При мазании следует обратить внимание на:
(1) Предметное стекло необходимо очистить.
(2) Предметное стекло должно быть плоским.
(3) Покрытие должно быть равномерным. Нанесите каплю в среднюю правую часть предметного стекла и равномерно распределите ее с помощью препаровального лезвия или зубочистки.
(4) Покрытие должно быть тонким. Используя в качестве предметного стекла другое предметное стекло, аккуратно проведите справа налево по поверхности предметного стекла с нанесенной жидкостью (угол между двумя предметными стеклами должен составлять от 30 до 45 градусов) и нанесите равномерный тонкий слой.
(5) Исправлено. Если требуется фиксация, для фиксации можно использовать химические фиксаторы или методы сушки (бактерии).
(6) Окрашивание. Бактерии используют метиленовый синий, а кровь — раствор для окрашивания по Райту. Красящий раствор должен покрывать всю поверхность покрытия.
(7) Промыть. Используйте впитывающую бумагу, чтобы впитать или высушить.
(8) Запечатайте пленку. Долгосрочная консервация с использованием пленки из канадского дерева.
2. Метод прессования таблеток
Метод сжатия — это метод нарезки биологических материалов путем помещения их между предметным стеклом и крышкой, применяя определенное давление для диспергирования клеток ткани.
Общий процесс метода прессования таблеток:
(1) Выбор материала. Для наблюдения деления клеток в качестве материала следует выбирать свежие клетки тканей с активным клеточным делением. Такие как кончик корня, меристема кончика стебля, клетки костного мозга, пыльники (материнские клетки пыльцы). Сперматозоидные гнезда (сперматоциты) и т. д.
(2) Исправлено. Фиксацию материала можно определить в соответствии с потребностями, образец следует немедленно сжать и осмотреть. Нет необходимости проводить отдельную фиксационную обработку (синхронно с окрашиванием); Если материал не проверен сразу после отбора проб, его можно зафиксировать фиксатором (обычно уксусно-спиртовым фиксатором). После фиксации в течение 2–24 часов (в зависимости от материала) промойте 95%-ным этанолом и храните в 70%-м этаноле для дальнейшего использования.
(3) Разделение. Материалы, которые с трудом диспергируются клетками, следует обрабатывать раствором для гидролизного разделения (например, 1 н. HCl или спермой соляной кислоты) в течение 6–20 минут. После диссоциации их следует промыть водой перед окрашиванием.
(4) Окрашивание. Существует много видов красителей. Хромосомы обычно окрашивают раствором уксусной кислоты в пурпурный цвет.
(5) Нажмите на планшет. Поместите материал на предметное стекло, добавьте каплю воды или раствора красителя, накройте предметное стекло крышкой и слегка прижмите его большим пальцем.
(6) Наблюдайте. После сжатия его можно наблюдать под микроскопом.
