Существует два типа флуоресцентных микроскопов в зависимости от их оптического пути:
1. Просвечивающий флуоресцентный микроскоп: источник возбуждающего света проходит через конденсорное зеркало через материал образца для стимуляции флуоресценции. Обычно используемый коллектор темного поля, также можно использовать обычный коллектор, отрегулируйте отражатель так, чтобы свет возбуждения передавался и обходил образец. Это старый тип флуоресцентного микроскопа. Преимущество состоит в том, что флуоресценция сильна при малом увеличении, а недостатком является то, что флуоресценция ослабевает с увеличением увеличения. Поэтому лучше наблюдать за более крупным образцом материала.
2. Флуоресцентный микроскоп падающего типа. Это новый тип флуоресцентного микроскопа, разработанный в последнее время. Отличие состоит в том, что возбуждение света от линзы объектива опускается на поверхность образца, то есть той же линзы объектива, что и освещение концентратора и сбор флуоресцентного объектива. Оптический путь необходимо добавить к двухцветному сепаратору пучка, который составляет угол 45° со светом урана, свет возбуждения отражается в линзу объектива и собирается в образце, флуоресценция, создаваемая образцом и объективом Поверхность линзы, поверхность защитного стекла одновременно отражает свет возбуждения в линзу объектива и обратно в сепаратор двухцветного луча, так что свет возбуждения и флуоресценция отделяются от остаточного света возбуждения, а затем поглощаются блокирующие фильтры. Если вы замените другой комбинированный блок фильтра возбуждения/двухцветного сепаратора луча/блокирующего фильтра, вы сможете удовлетворить потребности различных продуктов реакции флуоресценции. Преимуществами этого флуоресцентного микроскопа являются равномерное освещение поля зрения, четкое изображение, чем больше увеличение флуоресценции, тем сильнее.
(B) метод флуоресцентного микроскопа.
1. Откройте источник света, ртутную лампу сверхвысокого давления, чтобы предварительно нагреть ее в течение нескольких минут, чтобы достичь самой яркой точки.
2. Просвечивающий флуоресцентный микроскоп необходимо установить между источником света и концентратором, необходимым для стимуляции фильтра, в задней части объектива с соответствующим блокирующим фильтром. Микроскоп падающей флуоресценции необходимо вставить в паз оптического пути необходимого фильтра возбуждения/двухцветного сепаратора пучка/блокирующего фильтра.
3. Наблюдайте в линзу небольшого увеличения и отрегулируйте центр источника света так, чтобы он располагался в центре всего пятна освещения согласно регулировочному устройству различных моделей флуоресцентных микроскопов.
4. Поместите срез образца, можно наблюдать фокусировку. При использовании следует обратить внимание на: в конце установки фильтров не используйте глаза для непосредственного наблюдения, чтобы не повредить глаза; при масляном зеркале для наблюдения за образцом необходимо использовать специальное нелюминесцентное масляное зеркало; Ртутную лампу высокого давления нельзя открывать сразу после закрытия лампы, необходимо подождать 5 минут, прежде чем можно будет начать снова, в противном случае она будет нестабильной, что повлияет на срок службы ртутной лампы.
(C) наблюдение. Под флуоресцентным микроскопом на этапе обучения с сине-фиолетовым светофильтром можно увидеть клетки, окрашенные 0,01% флуоресцентного красителя амидинового оранжевого цвета, а ядро и цитоплазма клеток возбуждаются, производя два разных цвета флуоресценции (темно-зеленый и оранжево-красный).
