В чем разница между флуоресцентной микроскопией и инвертированной микроскопией?
Микроскоп является важным инструментом в культуре клеток и связанных с ними экспериментах с производными. В настоящее время на рынке представлены различные типы микроскопов, и выбор микроскопа, который соответствует потребностям и подходит, является непростой задачей. Ниже мы познакомим каждого с принципами работы инвертированных микроскопов и флуоресцентных микроскопов на выбор.
Инвертированный микроскоп, как и обычный микроскоп, в основном состоит из трех частей: механической части, осветительной части и оптической части.
Состав инвертированного микроскопа такой же, как и у обычного прямого микроскопа, за исключением того, что объектив и система освещения перевернуты: первый находится под предметным столиком, а второй - над предметным столиком.
Такая конструкция значительно увеличивает эффективное расстояние между системой точечного освещения и сценой, что упрощает размещение более толстых инструментов наблюдения, таких как чашки с культурами и флаконы с клеточными культурами (конечно, можно использовать и стеклянные предметные стекла), в то время как рабочее расстояние между Объектив и материал не обязательно должны быть очень большими.
Инвертированный микроскоп используется в медицинских и медицинских учреждениях, университетах и научно-исследовательских институтах для наблюдения за микроорганизмами, клетками, бактериями, культурами тканей, суспензиями, осадками и т. д. Он может непрерывно наблюдать за процессом пролиферации и деления клеток и бактерий в культуральной среде, а также может отразить любую форму этого процесса.
Широко используется в таких областях, как цитология, паразитология, онкология, иммунология, генная инженерия, промышленная микробиология и ботаника.
Флуоресцентная микроскопия используется для изучения всасывания, транспорта, распределения и локализации веществ внутри клеток.
Для испытуемого объекта существует два способа генерации флуоресценции: спонтанная флуоресценция, испускаемая непосредственно ультрафиолетовым излучением; Вторичная флуоресценция возникает, когда наблюдаемый объект обрабатывается флуоресцентными красителями и подвергается воздействию ультрафиолетового света перед тем, как начать излучать флуоресценцию.
Некоторые вещества в клетках, например хлорофилл, после воздействия ультрафиолетового излучения вызывают спонтанную флуоресценцию; Некоторые вещества сами по себе могут не излучать флуоресценцию, но при окраске флуоресцентными красителями или флуоресцентными антителами они также могут излучать вторичную флуоресценцию под действием ультрафиолетового излучения.
Флуоресцентный микроскоп использует точечный источник света с высокой светоотдачей для излучения света определенной длины волны (УФ 365 нм или синего УФ 420 нм) через систему цветовой фильтрации в качестве возбуждающего света, который возбуждает флуоресцентные вещества в образце, излучая различные цвета флуоресценции. После этого его наблюдают посредством увеличения объектива и окуляра.
Таким образом, даже при слабой флуоресценции он легко распознается и обладает высокой чувствительностью на сильном контрастном фоне. Он в основном используется для изучения структуры, функций и химического состава клеток.
