Три типа наблюдения под микроскопом
I. Светлое поле BF (Светлое поле BF)
Светлое поле BF — это известный метод микроскопии, который широко используется в патологии и тестировании для наблюдения за окрашенными срезами, и все микроскопы способны выполнять эту функцию.
Светлое поле
II. Темное поле DF (Темное поле DF)
Темнопольная DF на самом деле представляет собой освещение темного поля. Он отличается от светлого поля тем, что при нем непосредственно наблюдается не освещенный свет, а свет, отраженный или преломленный от исследуемого объекта. В результате поле зрения становится темным фоном, а исследуемый объект представляется ярким изображением.
Принцип темного поля зрения основан на явлении Тиндаля в оптике: пыль в случае сильного света при прямом освещении человеческий глаз не может наблюдать, это происходит из-за сильного света вокруг причины. Если свет направить на него под углом, частицы как будто увеличиваются в размерах за счет отражения света и становятся видимыми человеческому глазу.
Специальным аксессуаром, необходимым для наблюдения в темном поле, является зрительная труба в темном поле. Он характеризуется тем, что не позволяет лучу света проходить через обследуемый объект снизу вверх, а изменяет путь света так, чтобы он был направлен под углом к обследуемому объекту, чтобы освещающий свет не попадал непосредственно в объект исследования. объектив, а яркое изображение формируется за счет отраженного или дифрагированного света от поверхности исследуемого объекта. Разрешение наблюдения в темном поле намного выше, чем при наблюдении в светлом поле, * до 0.02-0.004
Даркфилд
III. Фазовый контраст PH
В развитии оптической микроскопии важным достижением современной микроскопической техники является успешное изобретение фазового контраста PH. Как мы знаем, человеческий глаз способен различать только длину волны (цвет) и амплитуду (яркость) световых волн, для бесцветных и ярких биологических образцов при прохождении света длина волны и амплитуда изменяются незначительно, и это затруднительно. наблюдать образец в светлом поле.
Фазово-контрастный микроскоп использует для микроскопического исследования разницу светового диапазона исследуемого объекта, то есть эффективно использует явление интерференции света для изменения неразличимой разности фаз человеческого глаза в различимую разность амплитуд, причем даже бесцветную и прозрачную. вещества могут стать отчетливо видимыми. Это значительно облегчает наблюдение за живыми клетками, поэтому фазово-контрастная микроскопия широко применяется в инвертированных микроскопах.
Основной принцип фазово-контрастной микроскопии заключается в том, что разница в оптическом диапазоне видимого света, проходящего через образец, превращается в разницу в амплитуде, тем самым увеличивая контраст между различными структурами и делая их видимыми. Свет преломляется через образец и отклоняется от первоначального пути света, задерживаясь при этом на 1/4λ (длина волны). Если 1/4λ снова увеличить или уменьшить, разница оптических дальностей станет 1/2λ, а интерференция между двумя лучами фотосинтеза усиливается после того, как оси двух лучей интерферируют, а амплитуда увеличивается или уменьшается, таким образом улучшение контраста. По своей структуре фазово-контрастный микроскоп имеет две особенности, отличающиеся от обычного оптического микроскопа:
1. кольцевая диафрагма (кольцевая диафрагма) расположена между источником света и конденсором, ее роль заключается в том, чтобы свет, проходящий через конденсор, образовывал полый конус света, фокусируясь на образце.
2. Фазовая пластинка (кольцевая фазовая пластинка) в объективе с покрытием из фторида магния. Фазовая пластинка прямого или дифрагированного света может задерживаться по фазе 1/4λ. Есть два вида:
1. Фазовая пластина: прямой свет с задержкой 1/4 λ, две группы световых волн, сложение коаксиальных световых волн, увеличение амплитуды, структура образца ярче, чем окружающая среда, образование яркого контраста (или отрицательного контраста). .
2.Б фазовая пластинка: дифрагированный свет задерживается на 1/4 λ, две группы световых волн после слияния оси световой волны уменьшаются, амплитуда становится меньше, образование темного контраста (или положительного контраста) ), структура темнее окружающей среды.
